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成都同盛閘門水利設備有限公司                                                 

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新聞動態

冠狀病毒在水和廢水中的存活

來源:中國給水排水作者:中國給水排水瀏覽數:16

德陽水利處理閘門廠家-德陽鋼制閘門鑄鐵閘門生產廠家產品符合SL41-2011《水利水電工程啟閉機設計規范》并嚴格執行NB/T35051-2015《水利水電工程啟閉機制造安裝及驗收規范》、SD507-2011《QL型螺桿式啟閉機系列參數》、SD-298-88《QL型螺桿式啟閉機標準》、CJ/T 3006-1992《供水排水用鑄鐵閘門標準》、NTB355055-2015《水利水電工程鋼閘門設計規范》等系列國家水利部執行標準及行業執行標準,并已通過ISO9001質量體系認證。德陽閘門廠家生產德陽鑄鐵閘門德陽鋼制閘門自產自銷,質量可靠。

嚴重急性呼吸綜合征的出現及其潛在的環境傳播表明,需要更多關于冠狀病毒在水和廢水中存活的信息。在過濾和未過濾的自來水(4℃和23℃)和廢水(23℃)中測定了代表性冠狀病毒貓傳染性腹膜炎病毒和人冠狀病毒229E的存活率。在相同的試驗條件下,將其與脊髓灰質炎病毒1型進行了比較。試驗水中冠狀病毒的失活高度依賴于溫度、有機物水平和拮抗細菌的存在。病毒效價下降99.9% (T99.9)所需的時間表明,在自來水中,冠狀病毒在23℃(10天)水中比在4℃(>100天)水中滅活得更快。冠狀病毒在廢水中迅速死亡,T99.9值在2~4天之間。除了4℃自來水外,脊髓灰質炎病毒在所有測試水中的存活時間都比冠狀病毒長。

01介紹

2003年嚴重急性呼吸系統綜合癥(SARS)在全世界造成了8000多例病例產生,死亡率約為10% (Manocha et al. 2003;Centers for Disease Control 2004)。最后已知的爆發是在2004年北京的一個研究實驗室。

這種疾病的原因被確定為一種新的人類冠狀病毒,很可能起源于麝貓,潛在宿主可能是蝙蝠(Guan et al. 2003; Lau et al. 2005; Wang et al. 2006)。冠狀病毒是有包膜的單鏈RNA病毒,大小從60~220納米不等。它們可以感染鳥類和哺乳動物,包括人類,并通過氣溶膠或糞便-口腔途徑傳播。冠狀病毒在爆發期間的迅速傳播表明,人類冠狀病毒的主要傳播方式是呼吸道飛沫;然而,沒有直接證據支持這一點(Belshe 1984)。由于迄今為止人類冠狀病毒感染被認為是一種溫和的、自我限制的疾病,因此關于其在環境中的傳播潛力的信息有限。

鑒于2003年3月在香港高層住宅區爆發的涉及300多人的SARS疫情與一個有缺陷的污水系統有關(Peiris et al. 2003),SARS疫情傳播可能與水和廢水有關。SARS-CoV可在腸道內復制 (Leung et al. 2003),這一事實使其成為一種可能的腸道病原體,而SARS病例中腹瀉的發生率在8%~73%之間(SARS流行病學工作組,2003),這引起了人們對其潛在環境傳播的關注。

Leung等人(2003)還報道,從SARS患者小腸中獲得的病毒培養物產量高于作為該病毒靶器官的肺組織。傳染性病毒是從SARS患者感染后3周內的糞便中分離出來的(Chan et al. 2004; Liu et al. 2004)。SARS的出現及其傳播問題表明需要更多的信息,特別是冠狀病毒在水和廢水中的存活情況。本研究比較了代表性冠狀病毒和脊髓灰質炎病毒1型在自來水和廢水中的存活情況。

02材料和方法

貓傳染性腹膜炎病毒(FIPV) (ATCC-990):一種貓科動物的腸道冠狀病毒,在克蘭德爾里瑟貓腎細胞系(CRFK) (ATCC-94)中繁殖和檢測。人冠狀病毒229E (HCoV) (ATCC-740):一種呼吸道病毒,在胎兒肺成纖維細胞,MRC-5細胞系(ATCC-171)中繁殖和分析。脊髓灰質炎病毒1 LSc-2ab (PV-1):一種已知的在環境中非常穩定的人類腸道病毒,在布法羅綠猴腎(BGM)細胞系中繁殖和檢測。德陽閘門廠家生產德陽鑄鐵閘門德陽鋼制閘門自產自銷,質量可靠。

在單層細胞中觀察到細胞致病作用(CPE)后,將感染細胞在-20℃冷凍和解凍三次以釋放病毒。隨后在1000g離心10分鐘以除去細胞碎片,加入到9%聚乙二醇(相對分子質量8000)和0.5 M氯化鈉的病毒懸浮液中,并在4℃下攪拌過夜。

在10000g離心30分鐘后,用0.01 M磷酸鹽緩沖鹽水(PBS; pH 7.4)(Sigma, St. Louis, MO)重懸至原始病毒懸液體積的5%。然后將冠狀病毒進行效價測定并儲存在-80℃下。脊髓灰質炎病毒通過用等體積的Vertrel XF (Dupont, Wilmington,DE)提取進一步純化,乳化后以7500g離心15分鐘,隨后收集頂層水層,進行效價測定并在-80℃儲存。

自來水樣本是從實驗室的冷水龍頭中采集的。水源是地下水,水質參數: pH 7.8,溶解固體297mg/L,總有機碳0.1mg/L。在收集樣品之前,讓水流動3分鐘。在未過濾的自來水和通過0.2μm孔徑過濾器去除細菌的自來水中測定病毒存活率。

將自來水(30mL)加入到無菌的50mL聚丙烯離心管中,以減少附著在容器上的病毒損失。添加無菌硫代硫酸鈉至最終濃度33μg/mL,以使水脫氯。渦旋后,將病毒添加到每個管中,最終濃度為105 TCID50/mL。再次渦旋離心管并立即取樣(零時間點)。然后將離心管儲存在4℃或室溫下(23℃)。室溫下儲存的離心管用鋁箔覆蓋,以防暴露在光線下。在1、3、6、10、15和21天后對離心管取樣,并將樣品在-80℃下冷凍,直到它們在細胞上被分析。

初級出水和剩余活性污泥(二級)的樣品來自于美國亞利桑那州圖森市羅杰路污水處理廠,并收集在無菌聚丙烯瓶中。沉淀后收集初級出水,氯化前收集二級出水。該設施一級出水的典型水質參數為生物需氧量(BOD)和1懸浮固體(10~220mg/L)。通常相比初級出水,二級出水中的BOD和懸浮固體減少了90%~95%。德陽閘門廠家生產德陽鑄鐵閘門德陽鋼制閘門自產自銷,質量可靠。